草果知母汤对戊四唑诱导癫痫大鼠海马神经元的保护作用及RECK/GFAP/AKT信号通路的调节作用

摘要

目的研究草果知母汤对戊四唑诱导癫痫大鼠海马神经元的保护作用及反转录富含半胱氨酸蛋白(RECK)/胶质纤维酸性蛋白(GFAP)/蛋白激酶B(AKT)信号通路的调节作用。方法将90只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、癫痫模型组、草果知母汤低剂量组、草果知母汤中剂量组、草果知母汤高剂量组及阳性对照组,每组15只,大鼠采用腹腔注射戊四唑方法建立癫痫大鼠模型,造模成功后,草果知母汤低、中、高剂量组分别给予2.5 mL/kg、5.0 mL/kg、10.0 mL/kg的草果知母汤灌胃,阳性对照组给予丙戊酸钠,每日1次,连续给药4周,实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)测定海马组织Bax、Bcl-2、Caspase-3 mRNA水平,尼氏染色法观察大鼠海马神经元尼氏小体水平,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)染色法检测大鼠海马神经元凋亡水平,免疫蛋白印迹法(Western Blot)检测大鼠海马组织RECK、GFAP、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、AKT水平。结果与癫痫模型组比较,草果知母汤各剂量组大鼠海马组织Bcl-2 mRNA水平、RECK及p-AKT水平升高,Bax、Caspase-3 mRNA水平、GFAP蛋白水平及海马神经元凋亡数降低,差异均有统计学意义(P<0.05),且各项指标变化表现出剂量依赖性,海马神经元尼氏小体染色明显改善。结论草果知母汤能够降低戊四唑诱导的癫痫大鼠海马神经元凋亡,调节凋亡相关基因表达水平,其机制可能与调节RECK/GFAP/AKT信号通路有关。