自噬相关基因4a在超氧化物歧化酶1-G93A突变型肌萎缩侧索硬化症转基因鼠大脑皮层和纹状体的表达

摘要

目的 检测自噬相关基因(Atg)4a在不同时期超氧化物歧化酶(SOD)1-G93A突变型肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠大脑皮层和纹状体中表达以探究Atg4a与ALS发病的关系.方法 SOD1-G93A突变型ALS转基因鼠和同窝野生型WT鼠于95 d(发病早期)、108 d(中期)和122 d(晚期)分别取材,运用定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)检测大脑皮层和纹状体中Atg4a mRNA水平,运用Western印迹技术检测蛋白水平,运用免疫荧光双标技术进行形态学检测.结果 与WT鼠相比,ALS鼠大脑皮层中Atg4a mRNA和蛋白在发病95 d和108 d表达上调,122 d下调,而纹状体中Atg4a mRNA在95 d、108 d和122 d均上调,Atg4a蛋白则在95 d、108 d表达上调,122 d下调,差异均有统计学意义(P<0.05).Atg4a在大脑皮层和纹状体中与神经元共表达.108 d,与WT鼠相比,ALS鼠大脑皮层和纹状体中Atg4a免疫反应性均显著增强(P<0.05).结论 Atg4a在大脑皮层和纹状体中的异常表达与SOD1-G93A突变型ALS转基因鼠发病关系密切.