分泌抗人精子单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定

摘要

建立两株分泌抗人精子单克隆抗体的杂交瘤细胞株G8与E10，采用洗涤人精子免疫Balb/c小鼠，取免疫脾与Balb/c 小鼠的Sp2/0骨髓瘤细胞融合，杂交瘤细胞诱生腹水的方法。Elisa,IIF或酶标抗体免疫组化法结果发现，G8与F10单抗与人精子（射出精子，睾丸，副睾管及输精管中的精子）及睾丸各级生殖细胞均发生反应；与人甲状腺上皮细胞，肾小管上皮细胞，胰腺导管上皮细胞以及胰岛均发生不同程度的交叉反应，与其他33种人体正常组织，9种人体液与分泌液，8种不同种族的动物精子均不发生交叉反应，说明在一般情况下这两种抗体可用于鉴定人类的精液斑以及精液与阴道分泌液的混合班，两种单抗与人精子的顶体部，赤道部，后核帽，颈部及中段结合，证明精子特异性表面抗原分布于这几个区域，两种抗体均属IgG1,G8与E10抗体的效价分别为1：512与1：1024