西达本胺联合苦参碱对皮肤T细胞淋巴瘤细胞系增殖、凋亡的影响及可能的凋亡机制

摘要

目的研究西达本胺联合苦参碱对皮肤T细胞淋巴瘤（CTCL）细胞系的增殖抑制和凋亡诱导作用, 探讨其凋亡机制。方法采用0.4 μmol/L西达本胺、0.6 g/L苦参碱单药或联合分别作用HH、Hut78细胞24、48、72 h后, MTS法检测HH、Hut78细胞增殖率。二甲基亚砜（DMSO）处理HH、Hut78细胞作为对照组。西达本胺、苦参碱单药或联合作用两细胞系48 h后, 流式细胞仪检测HH和Hut78细胞凋亡率, Western免疫印迹法检测各组细胞凋亡相关蛋白的表达。统计分析采用重复测量、单因素方差分析, 组间两两比较采用LSD-t检验。结果与对照组相比, 西达本胺、苦参碱单药或联合均能一定程度抑制HH、Hut78细胞增殖（F = 15.88、558.26, P ＆ 0.05、＆ 0.001）。48 h时, Hut78细胞系苦参碱组（20.98% ± 1.53%）、西达本胺组（22.44% ± 7.74%）和联合组细胞凋亡率（44.53% ± 1.85%）均显著高于对照组（8.42% ± 4.23%;LSD-t = 4.76、5.31、13.69, 均P ＆ 0.05）, 且联合组显著高于苦参碱组和西达本胺组（LSD-t = 8.93、8.37, 均P ＆ 0.01）。HH细胞系苦参碱组（13.98% ± 3.86%）、西达本胺组细胞凋亡率（13.61% ± 1.62%）与对照组（11.44% ± 1.43%）相比差异无统计学意义（均P ＆ 0.05）, 但联合组（20.94% ± 0.64%）显著高于对照组、苦参碱组和西达本胺组（LSD-t = 7.37、5.40、5.69, 均P ＆ 0.05）。HH细胞系中, 联合组caspase-3剪切体蛋白表达显著高于对照组、苦参碱组和西达本胺组（均P ＆ 0.05）, 而E-cadherin、p65、p-Bad及Bcl-2蛋白表达显著低于其他3组（均P ＆ 0.05）。Hut78细胞系中, 苦参碱组、西达本胺组和联合组E-cadherin、p65、p-Bad、Bcl-2蛋白表达均显著低于对照组（均P ＆ 0.05）, 仅西达本胺组和联合组caspase-3剪切体蛋白表达显著高于对照组（均P ＆ 0.05）。HH及Hut78细胞4组Bad蛋白表达差异均无统计学意义（均P ＆ 0.05）。结论西达本胺联合苦参碱可抑制HH、Hut78细胞增殖, 诱导其凋亡, 其机制可能与调控细胞凋亡相关蛋白E-cadherin、p65、p-Bad、Bcl-2及caspase-3剪切体蛋白表达有关。