小鼠角质形成细胞 MHC-Ⅰ类限制性内源性抗原递呈系统的构建

摘要

目的建立一转染小鼠角质形成细胞系 , 使其表达 MHC-Ⅰ类分子限制的卵白蛋白 ( ovalbumin, OVA) 抗原 . 方法将含有融合 OVA基因 ( 在角蛋白 5的启动子下 ) 和小鼠 H-2Kb的重组质粒转染于小鼠 PAM212细胞系 ( H-2Kd) . 采用 RT-PCR和流式细胞分析技术检测相应基因的转录及翻译水平的表达 . 结果本实验建立了 2个可表达小鼠 H-2Kb分子 (命名为 PAM-Kb) 的转染细胞系 , 4个可表达 OVA mRNA( 命名为 PAM-OVA) 的转染细胞系和 2个可同时表达小鼠 H-2Kb分子和 OVA mRNA 的转染细胞系 ( 命名为 PAM-OK) . 结论所建立的 MHC-Ⅰ限制的内源性抗原系统为进一步理解多肽 /MHC-Ⅰ复合体与具有相应特异 T细胞受体的 CD8+ T细胞之间的相互作用奠定了基础 .