低氧对系统性硬化病患者皮肤成纤维细胞胶原蛋白合成的影响

摘要

目的研究低氧对系统性硬化病（SSc）患者和正常人皮肤成纤维细胞胶原蛋白合成及胶原基因表达的影响。方法分别以5例SSc患者和5例正常人皮肤成纤维细胞系作为实验对象。将成纤维细胞分别放入20%正常氧和2%低氧分压环境中培养,用分光光度仪测定细胞培养基上清液中羟脯氨酸含量,并折算成胶原蛋白含量。用Trizol提取细胞总RNA,用RT-PCR方法测定其中Ⅰ型和Ⅲ型前胶原mRNA的表达。结果培养至第6天,低氧分压条件下,SSc患者皮肤成纤维细胞培养基中胶原蛋白含量比正常氧分压条件下显著增加（t=3.97,P=0.0041）;正常人皮肤成纤维细胞培养基中胶原蛋白含量此时也显著增加（t=2.63,P=0.0302）。培养至第3天,低氧分压条件下,SSc成纤维细胞Ⅰ型和Ⅲ型前胶原mRNA表达量比正常氧分压条件下均有显著增加（Ⅰ型:t=5.81,P=0.0004;Ⅲ型:t=6.44,P=0.0002）;正常人皮肤成纤维细胞此时的Ⅰ型和Ⅲ型前胶原mRNA表达量与SSc患者相似,低氧分压条件下比正常氧分压条件下均有显著增加（Ⅰ型:t=4.40,P=0.0023;Ⅲ型:t=2.24,P=0.0453）。结论低氧状态下,SSc患者和正常人皮肤成纤维细胞胶原蛋白合成均有增加,Ⅰ型和Ⅲ型前胶原mRNA表达也均增加.低氧可能是皮肤硬化的一个相关因素。