利用噬菌体随机9肽库筛选寻常型天疱疮抗原模拟表位

摘要

目的利用噬菌体随机9肽库筛选寻常型天疱疮抗原桥粒芯糖蛋白3（desmoglein,Dsg3）模拟表位,加深对寻常型天疱疮发病机制的认识。方法通过大肠杆菌表达Dsg3的胞外结构域1和2 （extracellular domain,EC1-2）和谷胱甘肽转移酶（GST）的融合蛋白,从寻常型天疱疮患者血清中纯化与ECI-2特异结合的多克隆抗体,对噬菌体随机线九肽库和环九肽库进行亲和筛选,阳性噬菌体展示肽经ELISA和竞争性ELISA验证。结果经过两轮亲和筛选,与自身抗体结合的噬菌体明显富集,免疫筛查、验证后得到3个阳性噬菌体展示肽,ELISA检测显示它们与患者血清反应,而不与正常人血清反应,竞争性ELISA检测显示它们可以抑制寻常型天疱疮患者血清与重组蛋白EC1-2的结合。结论利用噬菌体随机9肽库筛选到3个与寻常性天疱疮密切相关的模拟表位。