pORF5质粒蛋白拮抗LL37抗菌肽增强沙眼衣原体感染的初步研究

摘要

目的探讨pORF5质粒蛋白能否通过抑制LL37抗菌肽增强沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis,Ct）感染,并初步探讨其分子机制。方法表达并纯化GST—pORF5融合蛋白,融合蛋白经蛋白酶酶切制备不含GST标签的pORF5蛋白;pORF5蛋白和LL37单独或共孵育衣原体后再感染HeLa细胞,间接免疫荧光技术计数衣原体包涵体形成数量;荧光定量PCR检测TNF-α、LL37基因表达水平。结果单独Ct感染组衣原体包涵体形成单位（IFU）为3.8×10~5/ml,LL37处理组IFU为2.0×10~5/ml,pORF5蛋白处理组IFU为3.0×10~5/ml,pORF5蛋白和LL37共处理组IFU为3.1×10~5/ml。pORF5蛋白处理组、LL37与pORF5蛋白共处理组和单独Ct感染组之间比较,差异无统计学意义（P＞0.05）,但明显高于LL37单独处理组（P＜0.05）。pORF5蛋白和LL37共同处理组TNF-α表达水平明显高于LL37单独处理组（P＜0.01）;pORF5蛋白处理组较Ct处理组LL37基因转录水平下降了19%。结论 pORF5质粒蛋白能拮抗LL37抗菌肽增强Ct感染,其机制可能与上调肿瘤坏死因子α、下调LL37表达相关。