芒果苷抑制中波紫外线诱导人成纤维细胞提前衰老的相关研究

摘要

目的研究芒果苷是否对反复亚毒性剂量中波紫外线（UVB）诱导的人二倍体成纤维细胞的早衰起抑制作用及其可能的机制。方法实验分成空白对照组（不做处理）,UVB-应激诱导的提前衰老（SIPS）组（单纯照光）,芒果苷4.0 mg/L组（单纯加药）,UVB+芒果苷1.0 mg/L组、UVB+芒果苷2.0 mg/L组、UVB+芒果苷4.0 mg/L组（UVB照射联合药物处理）。成纤维细胞经5次UVB 10 mJ/cm~2照射后,用细胞计数法（CCK8法）检测细胞增殖活性,β半乳糖苷酶染色（SA-β-Ga1）计算衰老细胞百分比,流式细胞仪测定细胞周期,蛋白印迹检测衰老相关蛋白p53、p21、p16含量,实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测基质金属蛋白酶1（MMP1）、基质金属蛋白酶3（MMP3）、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA和衰老相关基因p53、p21、p16 mRNA表达。采用单因素方差分析进行数据统计分析。结果 UVB+芒果苷1.0 mg/L组、UVB+芒果苷2.0 mg/L组、UVB+芒果苷4.0 mg/L组以及UVB-SIPS组细胞增殖活性（A450）依次为0.322 9±0.011 3、0.336 10.016 3、0.342 6 40.014 4、0.288 2±0.020 7（F=110.08,P＜0.05）,β半乳糖苷酶染色阳性率依次为（88.83±4.54）%、（46.33±5.51）%、（32.17±6.05）%、（93.67±3.75）%（F=283.54,P＜0.05;与UVB-SIPS组比较,除UVB+芒果苷1.0 mg/L组外,其他两组均P＜0.05）;G1期细胞阻滞率依次为（72.19±3.42）%、（60.99±2.70）%、（49.80±2.10）%、（82.09±0.89）%（F=156.01,P＜0.05）。与UVB-SIPS组相比,UVB+各浓度芒果苷组细胞MMP1和MMP3 mRNA表达降低（F=69.41、106.41,均P＜0.05）,Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原mRNA表达增加（F=66.41、46.81,除UVB+芒果苷1.0 mg/L组P＞0.05外,其他各组均P＜0.05）,衰老相关基因p53、p21、p16 mRNA表达降低（F=265.60、151.82、329.85,均P＜0.05）,衰老相关蛋白p53、p21和p16的合成减少（F=160.51、158.53、75.38,均P＜0.05）,各指标检测值的变化与芒果苷浓度之间呈一定依赖性。结论芒果苷可能通过下调p53、p21、p16基因的表达来抑制UVB诱导的人二倍体成纤维细胞的早衰。