金黄色葡萄球菌肠毒素B对LAD2肥大细胞系活化作用的研究

摘要

目的用LAD2肥大细胞系与金黄色葡萄球菌肠毒素B（SEB）共培养, 探讨SEB对肥大细胞非IgE机制的活化作用。方法建立LAD2与不同浓度的SEB（0.01、0.1、1、10、100 μg/ml）以及A23187阳性对照、阴性对照的孵育体系, 培养箱中培养30 min后, 光镜下观察SEB对肥大细胞的细胞形态影响并收集各体系上清液, 通过酶活性法检测肥大细胞分泌的类胰蛋白酶浓度, 并通过ELISA法检测组胺水平。结果 LAD2与SEB共孵育30 min后,光镜下可见肥大细胞形态为细胞略增大、边缘模糊、突起增多, 折光性下降, 呈放射状毛刺样。LAD2与不同浓度SEB（0.01、0.1、1、10、100 μg/ml）共孵育30 min后, 上清液检测类胰蛋白酶浓度分别为（4.116 ± 0.651）、（5.344 ± 0.874）、（3.806 ± 0.459）、（1.309 ± 0.247）、（0.310 ± 0.199）ng/ml, SEB浓度在0.01、0.1、1 μg/ml时, 释放类胰蛋白酶浓度明显高于阴性对照组（P＆0.05）, 而SEB浓度继续增加则类胰蛋白酶浓度水平依次下降。不同SEB浓度下检测组胺水平分别为（242.409 ± 63.915）、（522.491 ± 73.466）、（550.926 ± 84.466）、（334.397 ± 33.640）、（226.527 ± 5.678）ng/ml, SEB浓度在0.01、0.1、1 μg/ml时, 肥大细胞释放的组胺浓度随SEB浓度的增加而增高, 明显高于阴性对照组（P＆0.05）;而SEB浓度继续增加时, 肥大细胞释放组胺浓度依次下降。结论 SEB可通过非IgE依赖机制直接作用于肥大细胞, 使肥大细胞活化发生形态变化并释放类胰蛋白酶和组胺。