广东地区梅毒螺旋体临床株的分离传代培养及非同义单核苷酸多态性检测

摘要

目的分离培养广东地区梅毒螺旋体（Tp）临床株（GD1）并探讨其与Nichols标准株非同义单核苷酸多态性（nsSNPs）的差异。方法从广东地区1例硬下疳患者皮损中分离出GD1, 在兔睾丸中连续传代培养。暗视野显微镜、TP0548基因PCR、测序和基因分型多重验证传代情况。泛影葡胺梯度离心法分离兔组织并浓缩GD1。测序验证TP0443和TP0584基因nsSNPs位点。结果本研究分离培养出的GD1株为TP0548 f亚型。与美国Nichols株比较, GD1株存在nsSNPs突变, 位于TP0443的突变导致编码的第120位氨基酸由苏氨酸变为丙氨酸, TP0584的突变导致编码的第314位氨基酸由丙氨酸变为苏氨酸。结论首次成功地从广东地区梅毒患者皮损中分离培养出GD1株Tp, 并从病原学水平证实GD1存在nsSNPs突变。