重组大疱性类天疱疮抗原片段的表达、纯化及鉴定

摘要

为了获得纯化的重组ＢＰＡＧ２片段，通过基因工程的方法在体外对ＢＰＡＧ２片段的重组ｃＤＮＡ克隆进行了诱导表达。重组质粒ｐＫＰＬ－ＢＰＡＧ２转化至大肠杆菌ＰＯＰ２１３６中并经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表达产物。结果细菌表达出了分子量为２２５００的非融合性ＢＰＡＧ２片段，与对应的ｃＤＮＡ长度相符合，凝胶扫描分析表达产物占细菌总蛋白的１８．１％。重组片段经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ纯化后，利用免疫印迹方法证实保留了ＢＰＡＧ２特异的免疫活性，我们认为该重组蛋白片段可以进一步应用于类天疱疮的体外诊断试验