内皮素3/内皮素受体B对A375细胞NF-KB/Bcl-2相关蛋白A1抗凋亡通路的调节

摘要

目的研究内皮素3（ET-3）对人恶性黑素瘤（MM）A375细胞核因子（NF）-κB/Bfl-1抗凋亡通路的调节。方法用ET-3（100 nmol/L）刺激A375细胞24 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡率。RT-PCR及Western印迹测定不同浓度ET-3（0、1、10、100 nmol/L）及其与内皮素受体B（ETRB）阻断剂BQ788联合干预A375细胞后,Bfl-1在mRNA和蛋白质水平的表达。Western印迹检测相同条件干预下磷酸化NF-κB（pNF-κB）的蛋白表达。结果 ET-3可以降低A375细胞的凋亡率（F=10.68,P＜0.05）。ET-3对A375细胞Bfl-1 mRNA和蛋白表达水平的影响呈浓度依赖性上调,BQ788明显阻断ET-3上调Bfl-1的效应（P＜0.01）。Western印迹检测结果显示,ET-3显著上调pNF-κB的表达（P＜0.05）,BQ788干预下其表达水平降低,接近对照组,ET-3（100 nmol/L）+BQ788组与100 nmol/L ET-3组比较,差异有统计学意义（P＜0.01）。结论 ET-3/ETRB通过激活NF-κB/Bfl-1抗凋亡通路抑制A375细胞凋亡。