外胚间充质干细胞永生化的实验研究

摘要

目的: 探讨端粒酶催化亚基(hTERT)在外胚间充质干细胞永生化中的作用.方法:质粒pCIneo-hTERT转染外胚间充质干细胞,经G418筛选后获得抗性克隆.免疫细胞化学法及图像分析检测hTERT的表达,累计生长曲线检测细胞增殖能力.结果:转染后获3个抗性克隆.转染第3代细胞hTERT染色呈强阳性,转染后第15代细胞hTERT活性较正常培养的第15代细胞明显增强.转染细胞增殖能力有不同程度的增加,其中克隆2越过衰老期,寿命延长.结论:外源性hTERT介入可重建外胚间充质干细胞的端粒酶活性,使细胞延长寿命,得以永生.