Cbfαl对釉原蛋白转录调控作用的初步分析

摘要

目的:研究Cbfαl对釉原蛋白启动子转录活性的影响.方法:利用生物信息学的方法分析釉原蛋白启动子区域的序列,确定可能存在的结合位点,将利用PCR及酶切的方法从小鼠C57BL/6J基因组上扩增的、不同长度的釉原蛋白启动子构建的虫荧光素酶报告载体与Cbfαl共转Hela细胞,分析Cbfαl对不同长度的启动子转录活性的影响,将包含整个启动子区域的报告载体与Cbfαl共转Hela、CHO、UMR-106细胞,分析在不同细胞中Cbfαl对全长启动子转录活性的影响.结果:在Hela细胞中,Cbfαl对各段启动子都有激活作用,且该作用不随着启动子长度的变化而变化,在CHO、UMR-106细胞中,Cbfαl对启动子转录活性的影响很弱.结论:在Hela细胞中,Cbfαl对釉原蛋白启动子的转录活性有明显的增强作用,而且在对逐步缩短的启动子表现出一致的增强效能.结合生物信息学对Cbfαl结合位点的分析,可以初步判断在启动子下游,第一个内含子中存在Cbfαl的作用位点.另外,这种增强作用表现出明显的上皮细胞特异性,表明Cbfαl对釉原蛋白启动子的增强作用是有组织特异性的.