沉默Mcpr1促进大鼠牙乳头细胞增殖

摘要

目的:观察用RNAi技术沉默Mcpr1对大鼠牙乳头细胞增殖能力的影响.方法:分离培养原代大鼠牙乳头细胞,用KipofectamineTM2000将具有沉默Mcpr1作用的质粒pGenesil-shRNA、阴性对照的空载体转染大鼠牙乳头细胞,荧光显微镜观察转染效率,半定量PCR检测沉默效率,噻唑蓝(MTT)检测沉默Mcpr1后牙乳头细胞增殖能力的改变,流式细胞仪检测沉默Mcpr1后细胞周期的变化.结果:转染pGenesil-shRNA48 h后,Mcpr1的表达明显受到抑制,MTT结果显示转染pGenesil-shRNA后沉默组较末沉默组光吸收值明显增高,流式细胞仪检测沉默后的细胞周期在GO/GI期细胞比例明显下降.结论:pGensil-Mcpr1 shRNA载体能够抑制目的基因的表达.Mcpr1基因对牙乳头细胞的增殖具有明显的抑制作用.