大鼠脂肪干细胞的分离培养和鉴定

摘要

目的:体外分离培养大鼠脂肪干细胞(Adipose derived stem cell,ADSCs),并进行鉴定.方法:取出生后4 d SD大鼠的腹股沟皮下脂肪组织,经胶原酶消化获得脂肪细胞,通过有限稀释法克隆化培养、分离得到大鼠ADSCs,用含100 mL/L FBS的DMEM培养液培养并传代.测定克隆形成率;流式细胞仪进行干细胞分子表型(Stro-1,CD90,CD105,CD34)检测;并进行成骨、成脂、成神经诱导.结果:有限稀释法所得细胞,有较强的克隆形成能力,STRO-1、CD90、CD105阳性表达,CD34阴性表达.成骨、成脂、成神经诱导实验证明所得细胞有多向分化能力.结论:有限稀释法克隆化培养可成功分离得到高纯度的ADSCs,为ADSCs在组织再生中的研究提供了可靠依据.