Wnt信号通路在压力调控骨髓间充质干细胞膜片成软骨响应中的作用

摘要

目的:研究经典(Wnt/β-catenin,Wnt)信号通路在压力调控骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)膜片成软骨响应中的作用.方法:体外分离、培养兔BMSCs,经鉴定后用含有抗坏血酸的培养基构建BMSCs细胞膜片,并将其随机分2组;对照组在常规条件下培养4 d,实验组施以120 KPa静态压力,1h/d、连续4d.然后通过Western Blot检测经典Wnt信号通路相关蛋白的表达水平;Real-time PCR检测Wnt信号通路相关基因和成软骨基因的表达水平.结果:兔BMSCs传代后生长状态稳定,呈梭形;成骨成脂分化诱导实验结果阳性;Western Blot检测显示,实验组β-catenin和p-GSK3β蛋白表达水平均明显高于对照组(P<0.05);Real-time PCR检测显示,实验组经典Wnt信号通路相关基因β-catenin、p-GSK3β mRNA以及成软骨相关基因Col-Ⅱ、Sox-9、Aggrecan mRNA的表达水平均明显高于对照组(P<0.05).结论:Wnt/β-catenin信号通路介导兔BMSCs膜片在一定的压力刺激下的成软骨响应过程.