黑质LAMP2A过表达改善帕金森病恒河猴模型的运动功能

摘要

目的在帕金森病(Parkinson’s disease,PD)恒河猴模型上观察黑质过表达溶酶体相关膜蛋白2A(lysosome associated membrane protein 2A,LAMP2A)上调分子伴侣介导的自噬(chaperone-mediated autophagy,CMA)对实验猴运动行为的影响。方法应用立体定位注射仪向7只恒河猴的右脑纹状体区注射PD患者死亡后脑组织(自愿捐献)的路易小体(Lewy bodies,LBs)提取物,同时在左脑纹状体区注射非PD病人死亡患者的脑组织(自愿捐献)提取物来构建PD恒河猴模型。模型动物随机分为两组,LAMP2A过表达组(4只)在其黑质区双侧注射过表达LAMP2A的腺相关病毒载体;对照组(3只)在黑质区双侧注射对照病毒载体。通过阶梯实验、平板取食实验评价PD恒河猴模型运动能力和LAMP2A对该PD模型运动功能的影响。利用ELISA法对实验猴脑脊液、血清的总α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)及磷酸化α-syn水平进行测定。结果阶梯实验和平板取食实验中对照组恒河猴的左侧上肢的精细动作水平相较于其右侧出现下降;LAMP2A过表达组恒河猴的左右两侧上肢的精细运动水平没有出现明显差异;ELISA测定对照组术后12月脑脊液、血清的总α-syn水平及磷酸化α-syn水平显著增高;LAMP2A过表达组脑脊液磷酸化α-syn水平和血清磷酸化α-syn水平在8月之后均低于同期的对照组。结论过表达LAMP2A可能通过增加α-syn的CMA清除改善PD恒河猴模型精细运动能力。