α1-肾上腺素受体对胶原诱导性关节炎小鼠Treg细胞功能的影响

摘要

目的:利用胶原诱导性关节炎(CIA)模型小鼠,探讨去甲肾上腺素(NE)及其α1-肾上腺素受体(AR)对CIA小鼠Treg细胞的作用.方法:雄性DBA/1小鼠32只,随机分为对照组(n=8)和CIA模型组(n=24).Ⅱ型胶原(CⅡ)乳剂100μl尾根部注射DBA/1小鼠制备CIA小鼠模型,在初次免疫后第41日,用免疫荧光法检测小鼠脾脏中CD4+T与α1-AR的共定位情况;用Western blot法检测小鼠踝关节和脾脏中α1-AR的蛋白表达.分离纯化CIA小鼠脾脏中CD4+T细胞,用抗CD3和抗CD28的单克隆抗体刺激CD4+T细胞,进行细胞培养,分为未加药组和加药组,加药组用NE或α1-AR激动剂苯肾上腺素(phenylephrine)处理细胞,用流式细胞术检测CIA小鼠CD4+T细胞中Treg的细胞数;用Western blot法检测CIA小鼠CD4+T中转化生长因子-β(TGF-β)和IL-10的蛋白表达.结果:CD4+T细胞能够表达α1-AR;与对照组相比,CIA小鼠踝关节和脾脏中α1-AR的蛋白表达显著降低(P<0.01);与未加药的CIA小鼠的CD4+T细胞相比,NE加入后的CIA小鼠CD4+T细胞中Treg细胞的功能显著增强(P<0.01);α1-AR激动剂phenylephrine加入后的CIA小鼠CD4+T细胞中Treg细胞的功能显著增强(P<0.01).结论:激活CIA小鼠CD4+T细胞上的α1-AR可增强Treg细胞的功能,促进CD4+T细胞向Treg细胞方向分化,发挥抗炎作用.