大肠杆菌耐利福定突变基因的克隆及限制性酶切谱分析

摘要

采用利福定（ｒｉｆａｎｄｉｎｅ，ＲＥＬ）浓度梯度平皿筛选得４株耐ＲＦＤ大肠杆菌（ＲＦＤ的ＭＩＣ为５００μｇ／ｍｌ），边疆传两代其耐药性保持稳定，对４株耐ＲＦＤ大肠杆菌，采用酚一氯信法，酚－透析法和蛋白酶Ｋ－玻棒缠绕法提取其总ＤＮＡ和采用煮沸法、碱法提取质粒，经琼脂糖凝胶电泳分析，结果均未见质粒ＤＮＡ带。提示所试菌株的耐药系突变耐药，由染色体介导。对耐ＲＦＤ大肠杆菌２２８０，用蛋白酶Ｋ－玻棒缠绕法提