鲍氏不动杆菌耐喹诺酮类药物的机理研究

摘要

目的研究鲍氏不动杆菌对喹诺酮类药物的耐药机制.方法对临床上收集的耐环丙沙星鲍氏不动杆菌进行氟罗沙星摄取试验、外膜蛋白电泳、PCR扩增gyrA和parC基因、酶切分析和测序.结果耐药株药物聚积量不及敏感株的1/2,经碳酰氰间氯苯腙(CCCP)处理后,聚积量上升并接近敏感株;经SDS-PAGE电泳,耐药株与敏感株比较,外膜蛋白在约29ku条带处消失,而24ku处条带却明显增强;PCR-RFLP分析,gyrA基因能产生1条DNA片段,而parC基因则能产生2条片段;测序结果显示,其GyrA蛋白中所编码83位(相应于大肠埃希氏菌)氨基酸由丝氨酸变为亮氨酸,ParC蛋白未见氨基酸改变.结论该株对环丙沙星耐药鲍氏不动杆菌存在DNA促旋酶变异,药物主动外运及外膜的改变.