紫外分光光度法检测金属β-内酰胺酶活性的研究

摘要

目的 建立以紫外分光光度法检测金属β-内酰胺酶活性的方法.方法采用以美罗培南作反应底物,中性羟胺与硫酸铁胺为显色体系,通过紫外分光光度计检测反应液中美罗培南剩余量计算金属β-内酰胺酶的分解量,从而计算出其酶活性.结果 美罗培南的浓度在1～5mg/mL范围内,线性良好,相关系数大于0.999.该方法检测限为0.05U,回收率在90％～119％范围内,重复性相对标准偏差为6.1％～8.7％.检测出的酶活性与酶蛋白含量成正相关.结论 该方法能有效区分金属β-内酰胺酶与非金属β-内酰胺酶,并准确反应金属β-内酰胺酶分解碳青霉烯类抗生素的能力.