人红细胞20S蛋白酶体的蛋白质组学表征及不同来源20S蛋白酶体异质性的研究

摘要

通过整合差速离心和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(native-PAGE)技术,建立了能有效分离20S蛋白酶体(20S core particle,CP)的方法.与传统纯化方法比较,此方法具有经济、快速的特点,并且能够对不同组织细胞来源的CP进行分离.利用本方法对人红细胞来源的CP亚基进行了2-DE分离和MALDI-TOF/TOF MS鉴定.结果显示,可鉴定出33个具有不同相对分子量和等电点的蛋白点,此数量远远多于CP亚基的14种.此外,利用非变性/变性十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(native/SDS-PAGE)技术,比较了来源于酵母、小鼠肝脏、人红细胞、人胰腺癌细胞系SW1990和PANC-1的CP及其亚基在电泳行为方面的差异,进行了蛋白酶体异质性初探.