FLP介导的酿酒酵母rDNA多拷贝定点整合

摘要

构建了一个带有ＦＲＴ位点以及启动子缺陷的ＵＲＡ３ｄ选择标记的环状质粒，并通过位点特异性重组将其整合到酵母染色体ｒＤＮＡ中放置的一个ＦＲＩ位点上。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析表明若处于很强的选择压力下，该质粒的拷贝数会发生有效的扩增。为了证明该质粒能够作为表达载体，将乙肝融合表面抗原ＳＡ－２８基因的表达单元插入该质粒后整合到ｒＤＮＡ位点。与ｒＤＮＡ位点整合了单个表达单元的菌株相比，ＳＡ－２８蛋白的表达量