HIV-1核心蛋白的表达与纯化

摘要

将编码人Ⅰ型免疫缺陷病毒(HIV-1)核心蛋白p24gag的基因序列克隆到原核表达载体pET28(b)中,高效表达了N-,C-端融合His·Tag p24蛋白,所表达的重组p24蛋白占菌体总蛋白的46%.在变性条件下,使用Ni-NTA亲和层析法纯化了p24蛋白,纯度为94%.菌体中及纯化、复性后的目的蛋白均能与抗HIV-1 p24单克隆抗体发生特异性反应.用纯化的p24蛋白免疫小鼠,4周时小鼠血清抗p24抗体效价达1∶400.实验结果表明:大肠杆菌表达的HIV-1 p24蛋白纯化后可用作HIV-1检测试剂的原料.