致病性鳗弧菌金属蛋白酶基因克隆及序列分析

摘要

从我国山东沿海发病的鲈鱼(Lateolabrax japonicus)分离到一株致病性鳗弧菌(Vibrio anguillarum)W-1,该菌的胞外蛋白酶活性为4226u/ml,部分纯化的胞外蛋白酶对海水养殖大菱鲆鱼有一定的毒性.应用PCR扩增,从鳗弧菌W-1染色体DNA扩增出一条长约1.925kb的特异性PCR产物,DNA序列分析表明:克隆的片段含有完整的金属蛋白酶基因阅读框,编码611个氨基酸残基的蛋白质,该金属蛋白酶基因与一株致病性鳗弧菌蛋白酶基因的核苷酸及氨基酸序列同源性为100%,而与解蛋白弧菌(V.proteolyticus)、创伤弧菌(V.vulnificus)、霍乱弧菌(V.cholerae)、斑点气单胞菌(Aeromonas punctata)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)的氨基酸序列同源性分别为73%、70%、69%、53%、51%.