人凝血因子IX在脆壁克鲁维酵母中的表达与分泌

摘要

通过改造人凝血因子IX基因(h-FIX)使其与乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)的分泌信号序列(Kss)融合,并置于脆壁克鲁维酵母(K. fragilis)LAC4基因调控型启动子的控制之下,构建成h-FIX基因表达盒.将此表达盒插入克鲁维酵母的整合质粒,得到了一个高稳定的h-FIX基因整合表达载体pHKB202-FP.经摇瓶培养并以半乳糖诱导此表达载体转化的酵母菌株, ELISA检测显示酵母上清液中的人凝血因子IX表达量可达到约200 ng/ml.此结果表明人凝血因子IX蛋白首次成功地在脆壁克鲁维酵母中得到了表达和分泌.这对于促进人凝血因子IX的基因工程产业化具有实际意义.