类泛素化neddylation修饰调控乳腺癌中核纤层蛋白lamin B1的表达

摘要

背景与目的:类泛素化neddylation修饰在乳腺癌中的作用鲜有报道。该研究的前期研究发现,抑制neddylation修饰可诱导乳腺癌细胞发生衰老,但具体机制尚未完全阐明。研究报道核纤层蛋白lamin B1缺失可导致细胞衰老。本研究旨在探讨在乳腺癌中,neddylation修饰与lamin B1是否存在相关性及其可能的机制。方法:利用113例乳腺癌患者肿瘤组织制成的组织芯片对neddylation修饰过程中关键蛋白神经前体细胞表达发育下调蛋白8(neural precursor cell expressed developmentally downregulated protein 8,NEDD8)、NEDD8活化酶E1(NEDD8-activating enzyme 1,NAE1)及核纤层蛋白lamin B1进行免疫组织化学染色。采用Spearman rank分析NEDD8和NAE1与lamin B1表达的相关性。采用CRISPR/Cas9技术敲低NEDD8的表达以阻断neddylation修饰,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测neddylation修饰对Lamin B1表达的调控作用及其机制。结果:Lamin B1表达与NEDD8(r=0.817,P<0.0001)和NAE1(r=0.406,P<0.0001)表达呈显著正相关。敲低NEDD8以阻断neddylation修饰可显著抑制Lamin B1的表达。沉默P53表达可部分逆转阻断neddylation修饰对lamin B1表达的抑制。结论:Neddylation修饰与lamin B1表达呈正相关,靶向neddylation修饰可能通过P53依赖的方式抑制lamin B1的表达。这为乳腺癌的治疗提供了新的靶点和方向。