蛋白激酶CβⅡ通过IL-6自分泌途径促进肝细胞癌侵袭的研究

摘要

背景 与目的:肿瘤微环境中存在的炎性因子参与肿瘤的生长及转移,蛋白激酶CβⅡ(protein kinase CβⅡ,PKCβⅡ)能否通过调节炎性因子参与肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的侵袭尚不清楚.研究PKCβⅡ对HCC侵袭的作用及相关机制,深入探讨PKCβⅡ与肿瘤炎性微环境之间的关系.方法:收集PKCβⅡ高表达细胞的条件培养基处理HCC细胞,采用transwell法检测细胞的侵袭情况,采用细胞因子抗体芯片检测上清液中细胞因子的变化,采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测PKCβⅡ高表达对白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)上清液中含量及转录的影响,采用transwell法检测IL-6中和抗体及IL-6受体(IL-6 receptor,IL-6R)中和抗体对PKCβⅡ高表达诱导HCC细胞侵袭的影响,采用Western blot检测信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、P-STAT3的蛋白表达,采用非参数Spearman检验分析HCC组织中PKCβⅡ和IL-6表达的相关性.结果:采用PKCβⅡ高表达细胞的条件培养基处理可以提高HCC细胞Huh7(P<0.01)和Hep3B(P<0.05)的侵袭能力;PKCβⅡ高表达显著提高上清液中IL-6的含量(P<0.01)及IL-6的转录(P<0.01);IL-6中和抗体及IL-6R中和抗体均可以抑制PKCβⅡ介导的HCC细胞侵袭能力的增加(P<0.01),P-STAT3蛋白表达升高(P<0.05);HCC组织中PKCβⅡ和IL-6的表达呈正相关(r=0.697,P<0.01).结论:PKCβⅡ通过IL-6自分泌途径促进HCC细胞的侵袭.