骨肉瘤中O-GlcNAc糖基转移酶的表达及其对增殖和顺铂敏感性的影响

摘要

背景与目的:O-GlcNAc糖基转移酶(O-GlcNAc transferase,OGT)广泛参与肿瘤细胞的生物学行为,并与癌症的进展相关.分析骨肉瘤中OGT的表达水平,并观察其对骨肉瘤细胞增殖和顺铂敏感性的影响.方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)及免疫组织化学法分析骨肉瘤组织中OGT的表达,并观察OGT的表达与临床病理学特点及与海南医学院第一附属医院收治的患者预后的关系.通过RNA干扰技术沉默骨肉瘤细胞中OGT的表达,通过细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)及5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2'-deoxyuridine,EdU)分析其增殖情况.然后采用顺铂作用于骨肉瘤细胞,采用RTFQ-PCR及Western blot分析OGT mRNA及蛋白的表达情况.进一步改变骨肉瘤细胞中OGT的表达后加入顺铂,采用CCK-8及流式细胞术观察对顺铂的敏感性及骨肉瘤细胞的活力.结果:RTFQ-PCR、Western blot及免疫组织化学结果显示,骨肉瘤组织中OGT的表达水平显著提升(P<0.05),OGT的表达与患者肿瘤直径的大小及病理学分期密切相关,且高表达的患者预后差(P<0.05).沉默骨肉瘤细胞中OGT的表达后,其增殖能力明显减弱(P<0.05),不同浓度的顺铂作用于骨肉瘤细胞后,OGT表达水平随着顺铂浓度的提升而提升.抑制骨肉瘤细胞中OGT的表达能够显著增强骨肉瘤细胞对顺铂的敏感性(P<0.05),相反过表达OGT会导致顺铂耐受.结论:OGT在骨肉瘤组织中高表达,且与患者的预后密切相关,沉默OGT的表达可以抑制骨肉瘤的生长并增强对顺铂的敏感性,OGT可能是骨肉瘤靶向治疗的潜在生物标志物.