Sema3A通过调控上皮-间质转化/基质金属蛋白酶-2参与上皮性卵巢癌转移

摘要

背景与目的:Semaphorin 3A(Sema3A)最初被认为在神经轴突导向中起重要作用,近期也被认为是一种候选的肿瘤抑制因子,参与肿瘤发生.探讨Sema3A与上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)转移的关系及其潜在机制.方法:选取2018年3月—12月于复旦大学附属上海市第五人民医院妇产科住院初治的20例腹腔转移的EOC患者(转移组)和20例无腹腔转移的EOC患者(非转移组)的卵巢组织蜡块标本,采用免疫组织化学法检测两组EOC患者卵巢组织标本中Sema3A的表达,并分析Sema3A与各组临床病理学特征的关系.蛋白质印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测5种卵巢癌细胞系中Sema3A的表达水平;构建Sema3A过表达和沉默细胞株;transwell法和划痕实验检测Sema3A对细胞侵袭和迁移能力的影响;Western blot检测细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关标志物和基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2蛋白的表达情况.结果:转移组较非转移组的Sema3A表达显著降低;转移组中,Sema3A表达与患者年龄、组织分化程度、肿瘤大小无关,而与病理学类型、国际妇产科联盟(International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)分期、有无淋巴结转移有关.5种卵巢癌细胞系中,A2780细胞Sema3A表达水平较低,Sk-OV-3细胞Sema3A表达水平较高.Sema3A过表达,细胞的侵袭和迁移能力下降,钙黏蛋白E(E-cadherin)、紧密连接蛋白-1(ZO-1)表达上调,钙黏蛋白N(N-cadherin)、锌指转录因子(Slug)和MMP-2表达下调;而Sema3A沉默后,细胞的侵袭和迁移能力增强,E-cadherin、ZO-1表达下调,N-cadherin、Slug和MMP-2表达上调.结论:Sema3A通过调控EMT/MMP-2途径参与EOC转移,可能作为预测EOC转移和预后的生物学指标.