环状RNA hsa_ circ_ 0005320在三阴性乳腺癌中的表达及其对细胞增殖的影响

摘要

cqvip:背景与目的:环状RNA(circular RNA,circRNA)作为新近发现的具有重要调节潜能的非编码RNA,与多种肿瘤的发生、发展密切相关,但在三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)中罕见报道。探讨hsacirc0005320在TNBC中的表达变化及其对细胞增殖的影响。方法:通过RNA测序(RNA sequencing,RNA-Seq)分析4对于重庆医科大学附属第一医院行手术切除的TNBC组织和癌旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerasechainreaction,RTFQ-PCR)验证20对TNBC组织和癌旁组织以及正常人乳腺上皮细胞MCF-10A和TNBC细胞MDA-MB-231、BT-549中hsacirc0005320的表达,并通过荧光原位杂交(fluorescencein situhybridization,FISH)实验进一步检测其在TNBC中的表达。采用RTFQ-PCR检测沉默hsacirc0005320后TNBC细胞中hsacirc0005320的表达;采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)和EdU实验检测细胞增殖;采用流式细胞术、Hoechst 33342、Tunel实验检测细胞凋亡;采用流式细胞术检测细胞周期;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测LIF-STAT3通路相关蛋白的表达情况。结果:hsacirc0005320在TNBC组织和细胞中显著高表达;在TNBC细胞中沉默hsacirc0005320后其表达量显著降低,细胞增殖能力下降,促进细胞凋亡,导致细胞周期阻滞在G1期,且LIF、P-STAT3蛋白表达水平明显下降。结论:hsacirc0005320在TNBC中高表达,沉默hsacirc0005320可显著抑制TNBC细胞的增殖,诱导细胞凋亡。