阿糖胞苷诱导HL-60细胞端粒酶各组分基因mRNA水平变化的研究

摘要

背景与目的:阿糖胞苷(Ara-C)是治疗急性非淋巴细胞白血病常用而有效的药物之一.端粒酶是一种特殊的核糖核蛋白复合物,在肿瘤的发生、发展中起着重要作用.本研究以Ara-C为诱导剂,检测了不同浓度、不同时间Ara-C作用HL-60细胞端粒酶各组分基因mRNA水平的变化,试图为临床阿糖胞苷的用药和评判化疗药效提供一些理论上的依据和指导.方法:采用不同浓度Ara-C作用相同时间、同一浓度Ara-C作用不同时间来处理HL-60细胞,通过流式细胞仪观察其凋亡和坏死细胞比例,RT-PCR方法检测端粒酶各组分基因hTERT、hTR和hTP1的mRNA水平变化.结果:①体外小剂量0～0.2 μg/ml的Ara-C诱导HL-60细胞12 h,端粒酶各组分基因在mRNA水平上无变化;②2μg/ml和10μg/ml Ara-C组,端粒酶hTERT mRNA水平由0.80±0.07分别下调至0.50±0.04和0.39±0.03而hTR、hTP1 mRNA无变化;③10μg/ml浓度的Ara-C作用HL-60细胞不同时间,随时间推移,细胞凋亡比例增加,12 h处达到最大值(18.16±4.25)%,随后降低;而细胞坏死比率一直随时间的延长而增加,48 h处的坏死比例在本实验的时间段处最大,为(57.94±12.03)%,同时hTERT基因mRNA水平也随着时间的延长而逐渐降低,48 h处达最低值0.18±0.03,而hTR、hTP1mRNA水平不随时间的延长而改变.结论:①阿糖胞苷下调hTERT基因的mRNA水平,且有浓度和时间依赖性,而对hTR基因、hTP1基因的mRNA水平无影响;②阿糖胞苷下调hTERT基因mRNA水平可能与阿糖胞苷诱导细胞坏死有关,而与诱导细胞凋亡无关.