不同干扰素-γ浓度上调乳腺癌细胞系Her2eu表达的实验研究

摘要

背景与目的:Herceptin是目前治疗Her2eu高表达晚期转移性乳腺癌的常用分子靶向药物.如将具有强烈细胞毒作用的放射性核素131I联结到Herceptin进行放免靶向治疗,可提高Herceptin的药效.放射免疫治疗的疗效主要取决于定位在瘤体的抗体量.而肿瘤摄取标记抗体的量与肿瘤细胞靶位分子的表达量密切相关.本研究探讨不同浓度IFN-γ对乳腺癌细胞系Her2eu的诱导效应,以选择最适IFN-γ浓度对乳腺癌细胞系Her2eu的表达以及131I-Herceptin结合率的影响.方法:取对数生长期乳腺癌细胞系MCF-7、SK-BR-3和BT-474,实验组以终浓度为10、100、500、1000U/ml的IFN-γ诱导培养48h,对照组加入等量不含IFN-γ的培养液.每组设置3个复管.各组三种细胞Her2eu的表达率及平均荧光强度(MFI)采用流式细胞仪(FACS)检测.采用Iodogen法对Herceptin进行131I标记,以高压液相层析法(HPLC)测定131I-Herceptin的放射化学纯度(RCP),以非竞争性饱和结合法测定三种细胞诱导前后对131I-Herceptin的结合量(Ncpm)及结合率(BR).诱导前后三种细胞Her2eu表达率、MFI和BR的差异采用t检验.结果:MCF-7、SK-BR-3和BT-474细胞Her2eu基础表达率分别为8.5%、97.8%和98.2%,IFN-γ浓度分别为10U/ml、100U/ml时,三种细胞Her2eu表达率以及MFI均未见显著性增高(t值未列出,P>0.05).IFN-γ为500U/ml以上时,MCF-7细胞Her2eu表达率显著提高(t=3.892,P<0.02),其它两种细胞表达率无明显变化(t值未列出,P>0.05),但三种细胞MFI均显著提高(P<0.05).而500U/ml和1000U/ml组间Her2eu表达率、MFI比较未见显著性差异(P>0.05).131I-Herceptin在MCF-7、SK-BR-3及BT-474细胞的基础结合率分别为(5.3±1.5)%、(34.8±4.9)%和(36.2±4.7)%.经IFN-γ诱导后三种细胞对131I-Herceptin的结合率均增高,当IFN-γ浓度在500U/ml以上以及SK-BR-3经IFN-γ浓度为1000U/ml诱导时,结合率均显著提高(t值未列出,P<0.05).Ncpm均不同程度提高,其中MCF-7增幅最明显,倍增比为2.8倍,SKBR-3和BT-474分别为1.5、1.6倍.结论:IFN-γ可以上调乳腺癌细胞Her-2eu的表达,在一定范围内IFN-γ浓度与Her2eu表达率及对131I-Herceptin的结合量存在相关性.