18β-甘草次酸诱导人乳腺癌细胞凋亡及其细胞内Ca2+水平的变化

摘要

背景与目的:18 -甘草次酸是甘草的重要成分,近年来的研究发现18 -甘草次酸具有抑制人淋巴细胞性白血病、肝癌和肺癌的细胞增殖.本研究探讨18 -甘草次酸对人乳腺癌MCF-7细胞诱导凋亡的作用.目前研究已证实细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)的动态变化在诱发细胞凋亡过程的多个环节中起重要作用,因此本研究也探讨由18-甘草次酸诱导的MCF-7细胞凋亡发生与[Ca2+]i变化的关系.方法:用50～250 μmol/L浓度梯度的18β-甘草次酸处理MCF-7细胞24h,用MTT比色法测定细胞增殖能力.100 μmol/L和150 μmol/L 18β-甘草次酸处理细胞24 h,用末端脱氧核苷酸转移酶介导dUTP末端标记法、Annexin V流式细胞仪法和单细胞凝胶电泳法检测凋亡细胞.150 μmol/L 18β-甘草次酸处理细胞24 h,用Fura-2荧光负载方法测定[Ca2+]i的变化.分别用100 μmol/L BAPTA-AM 和0.5 mmol/L EGTA与150 μmol/L 18β-甘草次酸联合处理MCF-7细胞24 h,用单细胞凝胶电泳法检测凋亡细胞.结果:从100 μmol/L 18β-甘草次酸浓度起对MCF-7细胞的增殖抑制率显著升高(P<0.01和 P<0.05),呈剂量依赖性,半增殖抑制浓度(IC 50)为234.33 μmol/L.100 μmol/L和150 μmol/L 18β-甘草次酸使细胞凋亡率显著升高(P<0.01和P<0.05);18β-甘草次酸处理组的[Ca2+]i也明显高于对照组(P<0.05).18β-甘草次酸与BAPTA-AM联合处理组和 18β-甘草次酸与EGTA联合处理组的凋亡率均明显低于单纯的150 μmol/L 18β-甘草次酸处理组(P<0.05和P<0.01).结论:18 -甘草次酸具有抑制MCF-7细胞增殖和诱导其凋亡的作用,而18 -甘草次酸诱导MCF-7细胞凋亡的作用在抑制该细胞增殖方面起主要作用.18 -甘草次酸诱导MCF-7细胞凋亡依赖于细胞内Ca2+水平上调,而细胞外Ca2+内流是导致细胞内Ca2+水平上调的原因之一.