端粒酶永生化原始乳腺癌组织来源细胞及其意义

摘要

背景与目的:乳腺癌细胞系大部分来源于乳腺癌转移所致的胸水或非原始乳腺癌组织来源,与真正的乳腺癌的生物学性状有很大差异.而仅部分细胞系直接由乳腺癌原代细胞在体外培养条件下成为永生化的细胞系,过表达人端粒酶逆转录酶(hTERT)可使正常人上皮细胞永生化.本研究将通过hTERT转染入原始乳腺癌组织来源的细胞建立永生化乳腺癌细胞系,并研究过表达hTERT对其他基因表达的影响.方法:通过重组逆转录病毒pBABE-hTERT-puro将hTERT基因导入原始乳腺癌组织来源的细胞,建立稳定表达hTERT的永生乳腺癌细胞.再利用微阵列技术检测乳腺癌细胞中hTERT诱导的基因表达改变.结果:Real-Time RT-PCR证实hTERT转染后的乳腺癌细胞中hTERT过度并稳定表达,为转染前表达量的1 400倍以上,并使得被转染的细胞永生化,可以传40～50代以上.微阵列结果进一步证实hTERT在转染后的细胞中过表达,另外,有22个基因在转染后的乳腺癌细胞中上调,未观察到所有细胞株中均下调的基因.结论:过表达hTERT可导致乳腺癌原代细胞的永生化,并对部分基因有上调作用.