Akt/c-Myc通路对胃癌细胞化疗效果的影响

摘要

背景与目的:Akt信号通路是调节原癌基因c-myc蛋白表达水平的主要机制之一,Akt信号通路激活后可降低胃癌细胞的化疗敏感性.然而,目前对Akt/c-Myc通路在胃癌化疗过程中的作用尚不明确.因此,本课题通过观察Akt/c-Myc信号通路对胃癌细胞化疗效果的影响并探讨其作用机制.方法:依托泊苷作用于胃痛SGC7901和BGC823细胞,MTT法榆测细胞的生存率;分别采用流式细胞仪和Hoechst33258荧光染色法检测细胞周期分布和凋亡;Akt活性的检测采用非放射性蛋白激酶活性分析法;Western印迹法检测c-Myc和p-AktSer~(473)蛋白的表达水平;RT-PCR法检测c-Myc mRNA的表达;同时观察P13-K/Akt通路抑制剂Wortmannin对依托泊苷诱导的上述变化的影响.结果:依托泊苷呈时间-剂量依赖性抑制SGC7901和BGC823细胞的生长,明显诱导细胞的凋亡;同时上调SGC7901和BGC823细胞中Akt活性及p-AktSer~(473)蛋白表达水平,并增强c-Myc蛋白和mRNA的表达.Wortmannin可明显增强依托泊苷的细胞生长抑制作用并提高细胞的凋亡水平;抑制依托泊苷诱导的c-Myc蛋白的表达,但对c-Myc mRNA表达没有明显的影响.结论:依托泊苷激活SGC7901和BGC823细胞中的Akz信号通路,并上调c-Myc蛋白的表达水平而影响胃癌的化疗效果.Akt信号通路可能主要是通过转录后调节来调控c-Myc蛋白的水平.