RNA干扰PAR基因表达对PC3细胞生长的影响

摘要

背景与目的:PAR(prostate androgen regulated)基因在雄激素非依赖性的前列腺癌中特异性高表达,可能与细胞的恶性转化有关.本研究采用RNA干扰技术下调前列腺癌PC3细胞中PAR基因的表达,并探讨其对PC3细胞恶性表型的影响及作用机制.方法:构建针对PAR基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达质粒psiRNA-PAR1、psiRNA-PAR2和psiRNA-PAR3,转染PC3细胞;采用RT-PCR法检测其对PAR基因的表达抑制作用;细胞计数、软琼脂克隆形成实验、流式细胞术检测PAR基凼表达下调对PC3细胞生长的抑制作用及其作用机制.结果:3组shRNA表达质粒均可抑制PC3细胞中PAR基因的表达:PAR基因的下调可使细胞生长速率明显减慢,增殖受到抑制;克隆形成能力降低,其中以psiRNA-PAR1的抑制效应最明显,并在转染48 h后对PAR基因表达的抑制率达最高峰,为(81.18±1.68)%;流式细胞术检测结果表明,细胞周期阻滞于G2/M期,凋亡增加.结论:PAR基因表达下调,明显地抑制PC3细胞的生长,其作用机制主要是通过诱导细胞G2/M期阻滞和凋亡实现的;PAR基因可能是一个新的与雄激素非依赖性前列腺癌细胞恶性表型相关的癌基因,有望作为基因及药物治疗雄激素非依赖性前列腺癌的一个新靶点.