蛋白激酶C抑制剂及激活剂对鸭肠炎病毒增殖的影响

摘要

为进一步探究鸭肠炎病毒(duck enteritis virus,DEV)的致病机理,试验采用鸭蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)的抑制剂星形孢菌素(staurosporine,SP)和激活剂佛波醇(phorbol 12-myristate-13-acetate,PMA)研究PKC/PKCI能否对DEV的增殖产生影响,为阐述DEV致病机理提供新的思路.用SP/PMA处理正常鸭胚成纤维细胞(duck embryo fibroblast,DEF)后,实时荧光定量PCR方法检测不同时间段PKC/PKCI基因表达;用DEV病毒液感染SP/PMA处理的DEF后,收集不同时间段培养物,以Reed Muench法计算DEV半数组织培养感染量(TCID50)值,实时荧光定量PCR方法检测分析DEV NP基因转录水平.结果显示,SP处理对宿主细胞PKC/PKCI基因表达水平无显著影响(P＞0.05);而PMA处理可极显著提高宿主细胞PKC基因表达(P＜0.01),但对PKCI基因表达水平无显著影响(P＞0.05);SP/PMA处理对DEV复制能力影响显著(P＜0.05;P＜0.01),且在感染前期可显著或极显著降低DEV NP基因的转录水平(P＜0.05;P＜0.01).综上所述,SP和PMA对PKC、PKCI基因表达水平的影响效果不同,且都能有效抑制DEV增殖,本试验结果可为DEV的防控及其致病机理的研究提供基础资料.