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肺炎克氏杆菌的nifA基因产物在巴西固氮螺菌...

         

摘要

通过三亲本杂交将质粒 pCK3[携带改变了启动子的肺炎克氏杆菌(Klebsiella pneumoniae)nifA 基因]引入巴西固氮螺菌(Azospirillum brasilense)Yu62菌株中,由此获得的转移接合子巴西固氮螺菌 Yu62-4菌株在6.0 mmol/L 以上 NH^+_4浓度下,能表现出微弱的固氮酶活性(相当于无 NH^+_4时活性的0.3—0.5%),而野生型 Yu62则全部丧失固氮酶活性。固氮酶的丙烯酰胺凝胶电泳和铁蛋白的免疫杂交实验表明,转移接合子 Yu62-4在高 NH^+_4(50mmol/L)下,虽有铁蛋白合成,但合成量比无 NH^+_4时少得多,而且有一部分铁蛋白未被共价修饰;野生型菌株 Yu62在此 NH^+_4浓度下无铁蛋白合成。实验结果表明:外源(来自肺炎克。’氏杆菌)的基因产物在巴西固氮螺菌 Yu62中不能有效地解除 NH^+_4对该菌固氮酶合成的阻遏作用。本文分析了出现这种现象的原因。

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