索拉菲尼诱导的肝癌细胞耐药和上皮间质转化与PI3k/Akt信号通路激活有关

目录

符号说明

前言

1、课题的研究意义

2、课题的研究内容

第一部分肝癌索拉菲尼耐药细胞的分子生物学机制研究

1、实验试剂和公司

2、实验材料与仪器

2.1细胞和动物来源

2.2.2 材料与仪器

3.1常用溶液的配制

3.2细胞计数

3.3细胞培养

3.4耐药细胞株的建立

3.5 肿瘤细胞克隆形成试验

3.6 CCK-8实验

3.7荧光定量PCR

3.8 Western Blotting (蛋白免疫印迹法)

3.9 Transwell小室侵袭实验

3.10 PI3k抑制剂LY294002

3.11尾静脉注射实验

3.12 HE染色

4、统计学方法

结果

1、肝癌细胞形态学的改变

2、CCK8对肝癌细胞株的药物敏感性实验

3、蛋白标准曲线的测定

4、 蛋白免疫印迹法检测亲本细胞和耐药细胞的蛋白表达差异

5、PCR检测亲本细胞和耐药细胞基因表达差异

6、肝癌耐药细胞具有增强细胞的迁移、侵袭能力

7、 LY294002逆转耐药株的机制研究

8、LY294004减弱耐药细胞的克隆能力

9、肝癌耐药细胞发生上皮间质转化与PI3k/Akt信号通路有关

讨论

第二部分肝癌耐药细胞和亲本细胞的LncRNA表达谱芯片分析

1、实验试剂和公司

2、实验材料和仪器

3、实验方法

3.1 LncRNA基因芯片检测

3.2差异mRNAs GO分析

3.3差异mRNAs通路分析

4、统计学分析

结果

1、芯片表达检测结果

2、靶基因GO分析

讨论

结论

参考文献

致谢