引 言
材料与方法
1 试剂、耗材和仪器
1.1 主要试剂
1.2 主要试剂的配制
1.3 主要耗材
1.4 主要仪器设备
2 实验方法
2.1 细胞培养
2.2 Transwell间接共培养实验
2.3 细胞外囊泡的分离与鉴定
2.4 胰腺星状细胞摄取细胞外囊泡的观察
2.5 CCK8检测细胞的增殖能力
2.6 细胞外囊泡与胰腺星状细胞共培养实验
2.7 Transwell检测细胞迁移能力
2.8 贴壁细胞和细胞外囊泡小RNA的提取
2.9 实时荧光定量PCR实验
2.10 细胞及细胞外囊泡蛋白的提取
2.11 蛋白质印迹实验检测目标蛋白的表达
2.12 细胞转染
3 统计学分析
结 果
1胰腺癌细胞PANC-1细胞外囊泡诱导胰腺星状细胞的活化
2细胞外囊泡的分离与鉴定
3胰腺癌细胞细胞外囊泡可以促进胰腺星状细胞的增殖、迁移和NF-κ的表达
3.1 胰腺星状细胞摄取胰腺癌细胞源性细胞外囊泡
3.2 胰腺癌细胞的细胞外囊泡促进胰腺星状细胞的增殖
3.3 细胞外囊泡诱导胰腺星状细胞的迁移
3.4 细胞外囊泡与胰腺星状细胞直接共培养,可以促进胰腺星状细胞NF-κB的表达
4胰腺癌细胞通过细胞外囊泡传递miR-301a-3p促进胰腺星状细胞的增殖、迁移和NF-κB的表达
4.1 miR-301a-3p在细胞系及其分泌的细胞外囊泡中的差异性表达
4.2 miR-301a-3p可以促进胰腺星状细胞的增殖,迁移及NF-κB的表达
讨 论
本研究存在的不足
今后工作展望
结 论
参考文献
综述:细胞外囊泡微小RNA:胰腺癌进展中的重要调控者
参考文献
攻读学位期间的研究成果
缩略词表
致 谢
声明
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