应用布氏白僵菌防治花生蛴螬的技术研究

摘要

为了解决由于长期大量使用化学农药所引起的环境污染、花生品质下降等一系列问题，寻找对花生蛴螬防治的新途径，探索无公害防治措施；同时，为了改变我国目前白僵菌（Beauveria）作坊式生产的状况，提供大批量优质高效的白僵菌产品，本文通过固体平板培养的方法，研究了布氏白僵菌的菌落特征、直径增长量、产孢量、萌发率等生物学特性，并优化了其液固两相发酵的条件和初步研究了其颗粒剂剂型。同时，用布氏白僵菌两个菌株（Bbr01和Bbr84）的粉剂和颗粒剂对蛴螬进行毒力测定，以筛选高毒力的菌株和剂型，并在田间应用布氏白僵菌两个菌株（Bbr01和Bbr84）的粉剂和颗粒剂对花生蛴螬进行防治试验，对其应用技术进行研究。
　　 1布氏白僵菌的液固两相发酵条件的优化
　　 以蛴螬罹病虫体上分离出的布氏白僵菌Bbr84菌株为对象，研究了白僵菌培养过程中液固两相的培养基配方，测定了不同液体种子培养基对同一固相培养基的产孢量，不同固体营养组合的产孢量，不同培养时间的产孢量和不同光照的产孢量。结果表明：PDA、SDAY、SDAY加2％麦芽糖三种液体培养基均可作为液相培养的培养基；用不同pH的液体培养基培养布氏白僵菌，结果是：pH6.0-7.0最适合布氏白僵菌的生长，在相同培养时间内生物产量最高，过酸或过碱环境都不利于布氏白僵菌的生长。固相培养阶段，以大米+稻壳+黄粉虫粪比其它组合培养料的产孢量都高，这一结果，为黄粉虫饲养副产品寻找到一条综合利用之路。在培养的第五天白僵菌产孢量达高峰，这比已报导的用其他培养料的配方产孢高峰时间缩短2-3天，培养总时间也随之缩短。避光培养更有利于Bbr84的生长及孢子萌发。利于产孢的最佳固相培养基起始含水率为58.5-65.5％。
　　 2布氏白僵菌Bbr01和Bbr84菌株对蛴螬的室内毒力测定
　　 以对蛴螬有高毒力的布氏白僵菌Bbr01和Bbr84菌株为对象，比较了室内其不同孢子浓度、不同剂型、剂量对蛴螬的毒力，并通过田间实验分别检测了两菌株的粉剂与颗粒剂两种剂型对蛴螬的防治效果。结果表明：室内实验，以1.0×108孢子/ml的孢子悬浮液和相同孢子浓度的粉剂接种到蛴螬3龄幼虫上，两菌株对蛴螬都具有较强的毒力，其中以Bbr01孢子悬浮液毒力更好，接种7天累积校正死亡率达66.3％，LT50为8.7d。每200g培养土混合2g Bbr01粉剂时，对蛴螬致病时间最短，LT50为9.2d。
　　 3颗粒剂的加工工艺
　　 本文研究了真菌颗粒剂的制作方法和应用三种工艺类型生产出的布氏白僵菌颗粒剂的特征，结果表明：挤出型布氏白僵菌颗粒剂的有效成分相比其它两种类型最高，为9.1％，且挤出型颗粒剂的堆积密度相比其它两种类型也最小，为0.98g/mL，且短期贮存萌发率高。
　　 4田间施菌对蛴螬的防治效果
　　 2008年在田间进行防治花生蛴螬试验，田间实验表明，Bbr01粉剂对蛴螬有明显的致病性，适宜在土壤中施用，如果在土壤中施入适当的剂量，可以有效控制蛴螬为害。

目录

文摘

英文文摘

声明

1.文献综述

3.材料和方法

3.1试验仪器

3.2防治蛴螬高毒力布氏白僵菌菌株的筛选

3.3 布氏白僵菌菌株培养条件的优化及高孢粉的制备

3.4颗粒剂加工工艺

3.5布氏白僵菌粉剂和颗粒剂对蛴螬的室内毒力试验

3.6施用布氏白僵菌粉剂和颗粒的田间防治试验

3.6.1田间小区设置与施药处理

3.6.2田间防效调查

3.7数据处理

4.结果与分析

4.1布氏白僵菌生物学特性研究

4.1.1培养形态观察

4.1.2不同菌株的平均生长速度、产孢量和萌发率比较

4.2两株布氏白僵菌不同孢子浓度对蛴螬的毒力测定结果

4.3布氏白僵菌液固两相培养条件的优化

4.3.1不同液体种子培养基对同一固相培养基产孢量的影响

4.3.2布氏白僵菌液体培养基最佳pH值的确定

4.3.3固体培养基组分对产孢量的影响

4.3.4液体种子接入量对产孢量的影响

4.3.5不同培养时间的产孢量

4.3.6光照对产孢量的影响

4.3.7培养基的含水量对产孢量的影响

4.3.8培养温度对产孢量的影响

4.4颗粒剂的加工工艺

4.5布氏白僵菌两菌株粉剂和颗粒剂对蛴螬的毒力

4.5.1布氏白僵菌两菌株粉剂和颗粒剂的乳悬液对蛴螬的毒力测定

4.5.2土中施用布氏白僵菌孢子对蛴螬的室内致病效果

4.6布氏白僵菌防治蛴螬的田间防治试验

5讨论

5.1布氏白僵菌的生物学观察

5.2布氏白僵菌大量生产技术

5.3对颗粒剂的评价

5.4田间用真菌防治蛴螬的影响因素

5.5真菌杀虫剂的应用前景

6结论

6.1布氏白僵菌的生物学

6.2布氏白僵菌大量生产技术

6.3 Bbr01和Bbr84两菌株对蛴螬的室内致病力

6.4颗粒剂的加工工艺

6.5田间施菌防治蛴螬的效果

6.6田间用真菌防治蛴螬的几点经验

参考文献

致谢

附图

作者简介