IL-17、IL-22在贲门失弛缓症患者血清及食管下括约肌中的表达及意义

摘要

贲门失弛缓症（Achalasia, AC）是一种因食管蠕动减弱或消失、食管下括约肌（Lower esophageal sphincter,LES）松弛障碍而导致的食管动力性疾病。该疾病的病因及发病机制至今仍未完全阐明。目前有一种假说认为，AC是多因素介导产生的疾病，即感染引起了LES肌间神经丛的炎症，随后该炎症激发有基因易感性的人产生了自身免疫反应，进而LES抑制性神经节遭到自身免疫介导的炎症破坏，受抑制性神经节支配的 LES出现松弛障碍而形成AC。因此，自身免疫介导的炎症反应可能在AC的发病过程中发挥着重要作用。
　　白介素17（Interleukin-17,IL-17）被认为是炎症性自身免疫疾病的关键介质，它能够促进中性粒细胞的聚集、固有免疫细胞的活化，并能够增强B细胞的功能以及诱导炎症因子的释放。白介素22（Interleukin-22,IL-22）属于IL-10家族中的一种，它在机体参与启动了对于病原体的固有免疫应答，并调控抗体产生，同时，也与自身免疫性疾病有着密切关系。IL-17及IL-22共同参与了许多自身免疫性疾病的炎症致病过程，在各种自身免疫性疾病中扮演重要角色。目前国内外关于IL-17、IL-22在AC中表达情况的研究少之又少，而IL-17、IL-22作为两种自身免疫炎性疾病的关键介质，其在AC中的表达情况对明确AC是否是一种由自身免疫介导的炎症性疾病具有重要提示作用。
　　目的：本实验通过酶联免疫吸附测定法（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）来研究IL-17及IL-22在正常人及AC患者血清中的表达，并通过免疫组化法来检测IL-17及IL-22在正常LES及AC患者LES中的表达，探讨IL-17及IL-22在AC中的意义，完善补充AC的病因学研究，为阐明AC的发病机制开拓新思路。
　　方法：1.随机选取2015年5月～2015年12月在河北医科大学第二医院接受经口内镜下肌切开术（Peroral endoscopic myotomy,POEM）的AC患者14例作为实验组。术前采患者的静脉血作为实验组的外周血标本，并选取健康人14例，采其静脉血作为对照组的外周血标本。应用ELISA检测14例AC患者及14例对照血清中IL-17及IL-22的表达情况；2.对上述14例AC患者在POEM术中活检钳钳取LES肌丝作实验组的组织标本，并选取2015年5月～2015年12月在河北医科大学第二医院接受内镜粘膜下隧道肿物切除术（Submucosal tunnel endoscopic resection, STER）的胃底粘膜下非侵袭性肿物患者12例，STER术中活检钳钳取正常LES肌丝作为对照组组织标本。通过免疫组化法检测14例AC患者LES及12例粘膜下肿物患者正常LES肌丝中IL-17及IL-22的表达情况。
　　结果：
　　1.IL-17与IL-22在外周血中的表达情况
　　1.1 血清中IL-17的表达水平：AC组中IL-17为71.69±16.94pg/ml，对照组中IL-17为46.90±13.86pg/ml，IL-17在AC组中的表达高于对照组，两组间表达的差异具有统计学意义（P<0.05）；
　　1.2 血清中IL-22的表达水平：AC组中IL-22为127.11±14.27pg/ml，对照组中IL-22为49.88±13.37pg/ml，IL-22在AC组中的表达高于对照组，两组间表达的差异具有统计学意义（P<0.05）；
　　1.3 AC组IL-17与IL-22在血清中的表达的相关性分析：IL-17与IL-22在AC组血清中的表达成正相关（r=0.876, P<0.05）。
　　2.IL-17与IL-22在LES中的表达情况
　　2.1 LES中IL-17的表达水平：IL-17的表达在细胞浆和细胞核，AC组中IL-17的累积光密度（Integral optical density, IOD）值为19913.27±4718.99，对照组中IL-17的IOD值为5111.80±1223.38，IL-17在AC组中的染色强度明显高于对照组，两组间表达的差异具有统计学意义（P<0.05）；
　　2.2 LES中IL-22的表达水平：IL-22的表达在细胞浆和细胞核，AC组中IL-22的IOD值为25193.05±6879.05，对照组中IL-22的IOD值为6563.54±2127.91，IL-22在AC组中的染色强度明显高于对照组，两组间表达的差异具有统计学意义（P<0.05）；
　　2.3 AC组IL-17与IL-22在LES中的表达的相关性分析：IL-17与IL-22在AC组LES中的表达成正相关（r=0.916, P<0.05）。
　　结论：
　　1.IL-17及IL-22在贲门失弛缓症患者的血清中表达增高，提示IL-17及IL-22可能参与了贲门失弛缓症的致病过程；
　　2.IL-17及IL-22在贲门失弛缓症患者的LES中表达增高，提示IL-17及IL-22可能参与了贲门失弛缓症的致病过程；
　　3.IL-17与IL-22在贲门失弛缓症患者血清及LES中的表达均呈正相关，提示IL-17与IL-22在贲门失弛缓症的发病机制中可能起协同作用；
　　4.IL-17和IL-22共同参与了自身免疫性疾病的炎症致病过程，在各种自身免疫性疾病中扮演重要角色，IL-17及IL-22在贲门失弛缓症患者血清及LES中表达增高，提示AC可能是一种自身免疫介导的炎症性疾病。

目录

封面

声明

目录

中文摘要

英文摘要

英文缩写

前言

材料与方法

1 研究对象

2 主要仪器及设备

3 主要试剂

4 实验方法

结果

1 IL-17及IL-22在血清中的表达情况

2 IL-17与IL-22在LES中的表达情况

附图

附表

讨论

1 AC与IL-17的关系

2 AC与IL-22的关系

3 IL-17与IL-22在AC中相互作用

结论

参考文献

综述: 贲门失弛缓症的发病机制及病因学研究进展

致谢

个人简历