脱脂滴血管基质片段凝胶模型的实验研究

摘要

目的：
　　探索寻求一种纯天然物理方法快速有效获取 SVF Gel模型，并鉴定模型的生物学特性，从而为提高获取及使用SVF/ADSC的效率提供有效途径。
　　方法：
　　1、SVF Gel模型的建立：获取人结构脂肪。制备前分组。用直二通管连接两个内装10 ml结构脂肪的10 ml螺旋口注射器，以设定的组别即不同体积流率Q和作用时间t进行处理，观察成熟脂肪细胞的破坏率。不同组别SVF Gel活死细胞检测。不同组别SVF Gel中ECM的扫描电镜下观察。流式细胞仪分析不同组别中 ADSC、内皮细胞、血液来源细胞各细胞群所占的比例。
　　2、SVF Gel模型的鉴定：SVF及SVF Gel中ADSC的分离及原代培养，体外成脂、成骨定向分化及检测。
　　结果：
　　1、相同体积流率，不同推注时间作用下，脂肪组织中的成熟脂肪细胞破坏程度不同。推注时间越长，破坏的成熟脂肪细胞越多，细胞外基质的破损越严重，但5min作用时，细胞外基质形态基本稳定。不同时间体积流率10 m/s作用下ADSC的量的变化无明显的统计学意义。
　　2、SVF Gel中分离培养出的ADSC具有体外成脂及成骨能力。
　　结论：
　　1、成功构建出SVF Gel模型：体积流率10 m/s，5 min处理结构脂肪可以最大程度的破坏成熟脂肪细胞，得到脱脂滴的血管基质片段凝胶。
　　2、SVF Gel中分离培养出的ADSC具有体外成脂及成骨能力。

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中英文缩略词表

第1章 SVF Gel模型的建立

1.1 前言研究背景：

1.2 材料

1.2.1 组织来源：

1.2.2 主要仪器设备

1.2.3 主要试剂与耗材用品

1.3 方法

1.3.1 人脂肪组织的获取

1.3.2 机械处理前分组及准备

1.3.3 机械处理人脂肪组织

1.3.4不同组别SVF Gel中活死细胞检测

1.3.5不同组别SVF Gel中ECM的扫描电镜下观察

1.3.6流式细胞检测

1.4 结果

1.4.1 SVF Gel获取流程及结构脂肪和SVF Gel实物获取结果

1.4.2 不同组别SVF Gel 中成熟脂肪细胞破坏程度的结果

1.4.3 不同组别SVF Gel活细胞数量及细胞浓度统计结果

1.4.4 不同组别SVF Gel 中细胞外基质破坏程度的结果

1.4.5 不同组别流式细胞分析结果

1.5 讨论

第2章 SVF Gel 模型的鉴定

2.1 材料

2.1.1主要仪器设备

2.1.2主要试剂与耗材用品

2.2 方法

2.2.1 SVF及SVF Gel 中的ADSC的分离

2.2.2 原代培养

2.2.3成脂、成骨分化

2.2.4 成脂、成骨能力的检测

2.2.5统计学分析

2.3 结果

2.4 讨论

第3章 总结与展望

3.1 总结

3.2展望：进一步工作方向

致谢

参考文献

攻读学位期间的研究成果

综述: 脂肪组织结构的完整性对移植后转归影响的研究进展