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致谢
摘要
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英文缩略表
1绪论
1．1课题背景
1．1．1食源性致病菌快速检测重要性
1．1．2转基因作物快速检测重要性
1．1．3本节小结
1．2核酸扩增检测方法的基本模块
1．2．1核酸提取
1．2．2核酸扩增
1．2．3核酸检测
1．2．4本节小结
1．3新型核酸扩增方法及应用进展
1．3．1环介导恒温扩增技术
1．3．2重组聚合酶扩增技术
1．3．3快速PCR扩增技术
1．4核酸终点检测面临的问题
1．5研究目的、内容和技术路线
1．5．1研究目的和内容
1．5．2技术路线
1．6本章小结
2热块上的核酸恒温扩增与比色法可视化检测方法建立
2．1引言
2．2实验部分
2．2．1材料和试剂
2．2．2仪器设备
2．2．3实验方法
2．3结果与讨论
2．3．1 LAMP扩增灵敏度和特异性评估
2．3．2快速核酸提取方法的灵敏度评估
2．3．3棉签擦拭取样检测加标对虾样本中的副溶血性弧菌
2．3．4棉签擦拭取样法与传统匀质取样法灵敏度比较
2．3．5磷酸根比色法检测加标对虾样本中的副溶血性弧菌
2．4本章小结
3交叉引物恒温扩增加速剂探究及便携式、防污染试纸条装置开发
3．1引言
3．2实验部分
3．2．1材料和试剂
3．2．2仪器设备
3．2．3实验方法
3．3结果与讨论
3．3．1普鲁兰多糖对CPA扩增加速作用探究
3．3．2普鲁兰多糖作为CPA扩增加速剂用于转基因大米DNA检测
3．3．3密闭性、便携式、防污染试纸条装置开发
3．4本章小结
4无需热块的核酸恒温扩增及荧光可视化检测方法建立
4．1引言
4．2实验部分
4．2．1材料和试剂
4．2．2仪器设备
4．2．3实验方法
4．3结果与讨论
4．3．1不同长度的引物对RPA扩增的影响
4．3．2 RPA扩增特异性和灵敏度测定
4．3．3 RPA扩增对非纯化DNA模板的兼容性评估
4．3．4体温触发RPA扩增的可行性评估
4．3．5荧光可视化检测的可行性评估
4．3．6体温触发的RPA扩增及可视化检测用于GTS 40-3-2转基因大豆筛查
4．3．7一体化非开盖装置用于RPA可视化检测
4．4本章小结
5快速PCR扩增用于可视化DNA分子计数方法建立
5．1引言
5．2实验部分
5．2．1材料和试剂
5．2．2仪器设备
5．2．3实验方法
5．3结果与讨论
5．3．1细柔性塑料管中的热传导过程建模分析
5．3．2快速PCR扩增时样本温度实时变化过程
5．3．3快速PCR扩增体系探究
5．3．4快速PCR扩增的灵敏度测定
5．3．5扩散和对流效应对扩增子荧光簇的影响
5．3．6扩增子荧光簇数目与DNA分子个数关系
5．3．7快速PCR扩增用于单分子水平DNA检测的可靠性评估
5．4本章小结
6．1主要研究结论
6．2主要创新点
6．3进一步研究展望
参考文献
作者简历
