咖啡因微乳局部靶向给药系统用于抑制UVB诱导皮肤癌的研究

摘要

咖啡因局部用药能够诱导紫外受损表皮细胞凋亡，进而抑制UVB诱导皮肤癌的发生。但是由于咖啡因是亲水性小分子，不容易透过皮肤表面的角质层进入皮肤内部发挥作用。因此本实验研究的目的是设计开发新型微乳系统作为咖啡因局部用药载体以促进咖啡因渗透通过角质层进入皮肤内部进而增加在皮肤内的滞留量，更好地发挥咖啡因的药效以抑制皮肤癌的发生。
　　在本研究中以咖啡因的溶解度和伪三元相图中水包油微乳区域面积为指标分别选择油酸聚乙二醇甘油酯为油相，聚氧乙烯蓖麻油为表面活性剂，三缩四乙二醇为助表面活性剂，表面活性剂/助表面活性剂的质量比为2:1。
　　在最优伪三元相图中，沿着水稀释线DL1/3（油与表活/助表混合物的质量比为1:3，w/w）选择含水量分别为50、60、70和80％的微乳处方(ME1-ME4)并进行物理化学表征。最优微乳处方ME4外观澄清透明，透射电镜照片显示微乳液滴近似圆球形。ME1-ME4的粒径范围在27.45到103.80 nm范围内，随着含水量的增加而降低。电导率则随着微乳中含水量的增加而增加。另外，最优微乳处方ME4表现出良好的离心稳定性和长期稳定性。
　　利用体外经皮渗透实验在ME1-ME4中筛选出最优微乳处方，结果显示ME4促进咖啡因渗透通过角质层，显著增加了咖啡因在皮肤内的滞留量，因此被选为最优处方，其主要成份包括5%(w/w)油酸聚乙二醇甘油酯，15%(w/w) Smix（表活/助表混合物，二者质量比为2:1），80%(w/w)水相。将亲水性荧光染料罗丹明B包载入ME4进行经皮渗透实验，通过观察皮肤各层荧光强度进一步证实了ME4能够改善亲水性药物的皮肤靶向性。
　　在体内药动学实验中，ME4中的咖啡因的皮肤内滞留量明显高于对照处方，与体外经皮渗透实验结果一致。而且，ME4体外经皮累积渗透量同体内药时曲线下面积具有点对点相关性。而在体内药效学实验中，咖啡因以ME4为局部用药载体时，增加了紫外受损表皮中凋亡细胞数目。
　　综上所述，本研究中的最优微乳处方ME4能够显著改善咖啡因的皮肤滞留量，为诱导紫外受损细胞凋亡进而抑制皮肤癌发生提供了大量实验数据和研究基础，具有广阔的应用前景。

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第一章 文献综述

1.1 皮肤癌的发生和防治

1.2 细胞凋亡与肿瘤的防治

1.3 咖啡因的介绍

1.4 微乳载体的介绍

1.5 课题设计

第二章 微乳处方筛选

2.1 试剂与仪器

2.2 咖啡因体外HPLC含量分析方法

2.3 咖啡因在各油相中溶解度的测定

2.4 微乳中伪三元相图的绘制

2.5 微乳处方的初步筛选

2.6 咖啡因微乳和对照处方的制备

2.7 咖啡因微乳的表征

2.8 微乳的稳定性考察

2.9 结果与讨论

2.10 本章小结

第三章 微乳处方优化

3.1 试剂与仪器

3.2 离体猪皮的制备与预处理

3.3 处方制备

3.4 体外经皮渗透实验

3.5 HPLC色谱条件

3.6 数据处理

3.7 咖啡因回收率考察

3.8 激光共聚焦显微镜实验

3.9 结果和讨论

3.10 本章小结

第四章体内动物实验

4.1 试剂和仪器

4.2 实验动物

4.3咖啡因体内HPLC分析方法

4.4 体内药物动力学研究

4.5 体内外相关性研究

4.6 体内药效学研究

4.7 结果和讨论

4.8 本章小结

第五章 全文结论及展望

5.1 主要结论

5.2 展望

参考文献

发表论文及科研情况说明

致谢