声明
第一章 绪论
1.1 研究背景与意义
1.2 国内外研究现状
1.2.1 上皮间充质转换(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)
1.2.2 细胞刚度与细胞骨架
1.2.3 原子力显微镜测量细胞刚度的原理
1.2.4 YAP与肿瘤发生发展
1.2.5 Arhgap28与肿瘤的发生发展
第二章 EMT进程中细胞力学特性的变化规律
2.1.1 细胞
2.1.2实验仪器
2.1.3 实验试剂及溶液配制
2.2 实验方法
2.2.1 TGF-β1的使用以及储存
2.2.2 细胞培养
2.2.3 免疫荧光染色
2.2.4蛋白免疫印迹(Western Blot)
2.2.5划痕实验
2.2.6 Transwell小室实验
2.2.7原子力显微镜
2.2.8流式细胞术
2.2.9测定F/G-actin比率
2. 2.910软件及统计分析
2.3.1 TGF-β1处理细胞诱导发生EMT
2.3.2 TGF-β1诱导细胞发生EMT后细胞迁移和侵袭能力的变化
2.3.3 TGF-β1诱导细胞发生EMT进程中细胞刚度的变化
2.3.3 TGF-β1诱导细胞发生EMT进程中细胞骨架的变化
2.4 讨论
2.5 本章小结
第三章 EMT进程中调控细胞刚度变化的机制
3.1 引言
3.2.1 细胞
3.2.2 质粒
3.2.3 引物序列
3.2.4 实验仪器
3.2.5 实验试剂
3.3 实验方法
3.3.1 RT-PCR
3.3.2 细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提
3.3.3蛋白免疫印迹(Western Blot)
3.3.5细胞转染
3.3.6 划痕实验
3.3.7 侵袭实验
3.3.8流式细胞术
3.3.9测定F/G-actin比率
3.3.10原子力显微镜
3.4 实验结果
3.4.1 EMT进程中YAP表达发生变化
3.4.2 YAP能够调控细胞的转移、侵袭以及细胞刚度
3.4.3 YAP通过调控Arhgap28蛋白调控细胞骨架
3.4.4 YAP可以通过Arhgap28影响细胞转移和侵袭
3.5 讨论
3.6 本章小结
第四章 结论与展望
4.1全文总结
4.2后续展望
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间取得的成果