芳香开窍药的挥发性成分对缺血缺氧PC12细胞的影响及部分机制研究

摘要

目的:研究四味芳香开窍药的挥发性成分对连二亚硫酸钠(Na2S2O4)致缺血缺氧PC12细胞的影响机制，拟从细胞分子水平探讨开窍药发挥神经细胞保护作用的物质基础及其机制。
　　方法:采用Na2S2O4导致大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤细胞株PC12（因具有神经内分泌细胞特征，常用于神经生理病理研究）细胞缺血缺氧损伤，观测细胞形态;用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)比色法，考察水蒸气蒸馏法提取的麝香、苏合香、安息香挥发性成分以及冰片对缺血缺氧PC12细胞活力的影响;并采用分光光度法，按照试剂盒要求测定其对PC12细胞Ca2+和NO的含量以及PC12细胞上清中的5-HT、DA、NE的含量。
　　结果:①麝香0.4、0.8、1.6μg/100μl，冰片0.8、1.6μg/100μl，苏合香2.0、4.0μg/100μl，安息香1.6μg/100μl组均能显著抑制Na2S2O4对PC12细胞的损伤，提高细胞活力（P＜0.05，P＜0.01）。②与空白组比较，模型组的细胞Ca2+含量显著升高;苏合香4.0、8.0μg/100μl，安息香0.4、0.8、1.6μg/100μl组的细胞Ca2+含量显著低于模型组（P＜0.05，P＜0.01）。③与空白组比较，模型组细胞NO含量显著降低;冰片0.8、1.6、3.2μg/100μl，苏合香2.0、4.0、8.0μg/100μl，安息香0.8、1.6μg/100μl各组细胞NO含量显著低于模型组(P＜0.01，P＜0.05)。④与空白组比较，模型组细胞上清中5-HT、DA、NE含量显著降低;苏合香4.0、8.0μg/100μl，安息香1.6μg/100μl较模型组5-HT含量显著升高(P＜0.05，P＜0.01);安息香0.4、0.8、1.6μg/100μl组与模型组比较，DA含量显著升高(P＜0.05，P＜0.01);与模型组比较，麝香、冰片、苏合香、安息香各剂量组的NE含量有降低趋势，但无显著性差异(P＞0.05)。
　　结论:四味开窍药的挥发性成分对缺血缺氧损伤的PC12细胞呈现明显的保护作用，其机制可能与降低细胞Ca2+浓度，抑制细胞内Ca2+超载，调节单胺类递质的紊乱有关。提示开窍药的挥发性成分可能是发挥保护缺血缺氧神经细胞的主要物质基础。

目录

摘要

英文缩略词表

引言

文献研究

1 开窍药的“性-效-用”研究

1．1 开窍药的来源

1．2 开窍药的文献研究

2 开窍药的现代研究

2．1 开窍药开窍醒神药效及机制研究现状

2．2 开窍类药的挥发油对心脑系统的作用研究

2．3 开窍药的化学成分研究现状

3 开窍药性效用共性与物质基础及药理作用特点的研究

4 神经功能活动与相关活性物质的关系

4．1 与Ca2+的关系

4．2 与NO的关系

4．3 与单胺类神经递质的关系

实验研究

1 实验材料

1．1 实验动物

1．2 药物及试剂

1．3 主要仪器设备

1．4 统计学处理方法

1．5 实验场地

2 实验方法及结果

2．1 开窍药挥发性成分对PC12细胞的方法学考察

2．2 开窍药挥发性成分对PC12细胞活力的影响

2．3 开窍药挥发性成分对PC12细胞相关活性物质的影响

讨论

1 开窍药挥发性成分发挥神经保护作用的研究意义

2 挥发油浓度选择依据

2．1 挥发油提取方法和计量

2．2 PC12细胞模型选择依据

3 开窍药对神经细胞的影响及其作用机制

3．1 对缺血缺氧PC12细胞活性的影响

3．2 对缺血缺氧PC12细胞内Ca2+含量的影响

3．3 对缺血缺氧PC12细胞NO的影响

3．4 对缺血缺氧PC12细胞单胺类递质含量的影响

结论

创新与特色

1．研究思路具有中医整体观特色

2．研究手段具有新意

问题与展望

致谢

参考文献

附图

在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果

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